但是很多定制合成的多肽在N端由于活性等原因不能进行Biotin,标记操作必须在C端进行.

这时候通常的策略有两种:

1. 通过树脂Biotin NovaTag™ resin或者Biotin-PEG NovaTag™ resin在固相合成时去除Fmoc基团后,在上面直接合成序列,整个多肽合成完成后,最后将多肽从树脂上切割下来,实现Biotin C端掺入.

Biotin NovaTag™ resin                Biotin-PEG NovaTag™ resin

缺点:这个树脂非常昂贵(5000元/g)

2. 通过Biotin-ED (Biotin-NH-CH2CH2-NH2)与全保护多肽的羧基液相反应.

缺点:操作比较麻烦,费时费力

3. 通过Fmoc-Lys(Biotin)-OH在多肽合成时将Biotin掺入在C端.

缺点:多肽羧基没有封闭